Пцр из секрета предстательной железы

Место ПЦР в диагностике хронического простатита

В течение последних 6 лет на базе медицинского центра «Андромед» ЗАО «Янинвест» в собственной лаборатории широко применяется в повседневной практике полимеразная цепная реакция (ПЦР) в диагностике ИППП. Диагностику хронического простатита мы проводим стандартными методами: ультразвуковое исследование, 3-стаканный анализ мочи, секрет предстательной железы (СПЖ) и его посев на флору с антибиограммой, при наличии полового анамнеза — мазок из уретры на ИППП методом ПЦР. Если у пациента установлен диагноз хронический простатит и в мазке из уретры выявлена ИППП, то на обнаруженную инфекцию мы исследуем кровь и СПЖ методом ПЦР. Нами отмечено, что диагностика методом ПЦР на ИППП должна быть комплексной (клинический анализ крови, анализ секрета простаты, мазок или соскоб из уретры) при:

• Неоднократных обращениях пациента по поводу урогенитальной инфекции;
• При обнаружении той или иной ИППП у полового партнера, чтобы избежать ложноотрицательных и ложноположительных результатов;
• Вялотекущих и плохо поддающихся лечению ХП.

С мая по октябрь 2003 г. мы провели ретроспективный анализ историй болезни 50 мужчин, которым была проведена ПЦР-диагностика. Из них 40 (80%) пациентов обратились впервые. У 10 (20%) обратившихся пациентов в анамнезе ХП, хронический уретрит. В этой группе больных методом ПЦР произведена комплексная диагностика ИППП в мазке из уретры, СПЖ и в анализе крови. У 7 (14%) пациентов в мазках из уретры, СПЖ выявлены ИППП, которые подтверждены методом ПЦР в анализе крови. У пациента О. № 909 в мазке из уретры методом ПЦР выявлена уреаплазма уреалитикум, а в анализе крови методом ПЦР выявлена хламидия трахоматис. После чего исследован СПЖ методом ПЦР, где выявлены хламидия трахоматис и уреаплазма уреалитикум. У 2 других пациентов в мазке из уретры ИППП методом ПЦР не выявлено, а в анализе крови методом ПЦР выявлено:

• У пациента Б. № 1010 — цитомегаловирус с высоким титром ДНК.
• У пациента Д. № 1122 — хламидия трахоматис.

Это послужило поводом для исследования СПЖ и соскоба из уретры (после алиментарной провокации) методом ПЦР, где удалось обнаружить выявленные ранее ИППП, что в конечном итоге позволило выбрать наиболее правильный путь в дальнейшей терапии этих пациентов.

Таким образом, метод ПЦР в комплексе (мазок из уретры, секрет предстательной железы, анализ крови) позволяет более детально разобраться в этиологии ХП, улучшить качество оказываемой помощи и избежать необоснованнной антибактериальной терапии у данной группы пациентов.

Секрет предстательной железы для ПЦР

Забор материала

1. После окончания массажа предстательной железы ее секрет в количестве 0,5-1 мл собирают в одноразовую стерильную пробирку объемом 1,5 мл.
2. При невозможности получить секрет – сразу после массажа собирают первую порцию мочи (в которой содержится секрет предстательной железы) в количестве 10 мл (см. правила забора мочи).

Предобработка проб

Предобработка образцов секрета предстательной железы, забранных после массажа предстательной железы, не требуется. В случае забора первой порции мочи после массажа предстательной железы взбалтывают флакон с мочой. Переносят 1 мл мочи, используя наконечник с фильтром, в стерильные одноразовые пробирки объемом 1,5 мл.

Центрифугируют 5 минут при 10 тыс. g (12 тыс об./мин. на центрифуге «MiniSpin», Eppendorf, Германия). Используя вакуумный отсасыватель с колбой-ловушкой, полностью удаляют супернатант, не захватывая осадок К осадку добавляют транспортную среду до конечного объема 0,2 мл, тщательно перемешивают содержимое па вортексе.

Условия хранения материала и предварительно обработанных проб

• при температуре 2-8°С – в течение 1 суток;
• при температуре минус 20°С – в течение 1 недели;
• при температуре минус 70°С – длительно.

Допускается только однократное замораживание-оттаивание материала.

Условия транспортирования материала и предварительно обработанных проб

Транспортирование клинического материала и предобработанных проб осуществляют в специальном термоконтейнере с охлаждающими элементами или в термосе со льдом:

• при температуре 2-8°С – в течение 6 часов;
• в замороженном виде – в течение 1 суток.

Как делают анализ секрета простаты, расшифровка и подготовка

Помимо оценки размера и плотности простаты, получаемой во время проведения пальцевого трансректального осмотра, большое значение имеет изучение производимого ею секрета. При выяснении причин развития заболевания, наравне с пальпацией и сканированием, анализ сока простаты является важной диагностической составляющей.

Что такое секрет простаты

Секрет предстательной железы – это мутная жидкость белесого цвета, выделяемая железой в ответ на стимуляцию естественного или искусственного характера. В норме, предстательный сок составляет не менее 30% от общего объема всего эякулята, производимого мужским организмом в момент оргазма. Секрет его назначения кроется в химическом составе, богатом как неорганическими, так и органическими веществами, среди которых выявляются белки, аминокислоты, ферменты и другие специфические частицы неклеточного типа.

Среди последних наибольшее значение имеют лецитиновые зерна, также называемые липоидными, и гиалиновые (амилоидные) тельца. Вкупе с остальными компонентами, эти вещества выполняют две важных функции:

1. Активация сперматозоидов.
2. Защита от агрессивных условий внешней среды.

Таким образом, предстательный секрет гарантирует мужскую фертильность и обеспечивает успешное продвижение сперматозоидов к яйцеклетке для последующего оплодотворения.

Показания к исследованию секрета

Основанием для проведения анализа на химический состав предстательного секрета может служить любое патологическое состояние, возникшее у пациента в работе мочеполовой системы. Данные, предварительно полученные с помощью пальпации железы, УЗИ или ТрУЗИ, а также классической трехстаканной пробы мочи, могут либо ничего не показать, либо потребовать уточнения для формирования последующей тактики лечения.

Так как забор секрета простаты связан с ее достаточно продолжительной стимуляцией (массажем), существуют некоторые ограничения на проведение процедуры, связанные с наличием внутри железы различных образований или острого инфекционного процесса.

К основным показаниям к исследованию секрета предстательной железы относят:

• простатит;
• аденому (доброкачественная гиперплазия);
• онкологические изменения;
• везикулит;
• туберкулез;
• склероз простаты.

Отдельно нужно отметить, что при подозрении на рак простаты взятие секрета проводится только в тех случаях, когда размер новообразования достаточно мал, чтобы при массаже не разорваться или не деформироваться.

Подготовка к анализам

Подготовка к анализу секрета простаты предшествует самому визиту к урологу, так как для получения объективной картины необходимо соблюсти ряд условий.

Во-первых, за несколько дней до сдачи анализа строго рекомендуется придерживаться консервативной диеты, подразумевающей отказ от спиртных напитков, жареной и жирной пищи, солений и копчений. Кроме того, потребуется на протяжении того же периода времени ограничить свою половую жизнь.

При анализе сока предстательной железы воздержание нужно по той причине, что оно позволит накопить в железе достаточно простатического сока для забора – это важно, если учесть вероятные проблемы с его выработкой.

Такое воздержание от секса и мастурбации даст специалисту возможность оценить динамику движения секрета в протоках и выявить возможное наличие застойных процессов.

Что касается подготовки к процедуре непосредственно накануне ее проведения, с учетом ее трансректальной специфики нужно провести несколько манипуляций и действий. Так как забор делают утром, уже с раннего вечера предыдущего дня надо полностью отказаться от пищи, и с утра предварительно провести очистительную клизму. В некоторых клиниках эта услуга включена в общий комплекс процедуры для помощи пациенту.

Далее утром на голодный желудок нужно прибыть на обследование, где сначала потребуется опорожнить мочевой пузырь для очистки уретры, а затем выпить 0,5-1 литр воды. Благодаря этому наполненный пузырь придавит простату к стенке прямой кишки, что упростит урологу ее обнаружение.

Нельзя не отметить факт психологического дискомфорта, испытываемого мужчиной во время массажа и стимуляции предстательной железы. Несмотря на старания врача, процедура может оказаться болезненной, особенно при воспаленном и гиперчувствительном состоянии простаты.

По этой причине, с разрешения специалиста, допускается однократный прием успокоительного средства, которое бы позволило пациенту расслабиться в достаточной степени. Наконец, во время предварительной консультации обязательно нужно сообщить урологу (или андрологу) о возможном приеме любых медицинских препаратов, так как некоторые из них могут быть несовместимы с условиями проведения анализа.

Как берут секрет простаты

Секрет простаты сдают согласно следующей методике, включающей ряд основных положений и манипуляций:

• раздевшись снизу до пояса, пациент либо ложится на кушетку на бок, поджав колени к груди, либо стоя раздвигает ноги и наклоняет корпус вперед, обеспечивая урологу доступ к аноректальной области;
• специалист, соблюдая стерильность и используя медицинскую смазку, вводит в задний проход пациента палец и, нащупав сквозь стенку кишки простату, начинает ее массировать;
• в среднем стимуляция делается около 3-5 минут, по истечении которых, в случае успеха, из мочеиспускательного канала должен выделиться простатический секрет;
• каплю или сгусток следует поймать на предметное стекло или в пробирку для последующей микроскопии сока простаты.

В случае тяжелых расстройств работы железы или ее функциональных застоев секрет при массаже простаты не выделяется, и для решения проблемы могут быть использованы различные методики.

Во-первых, процедуру можно попробовать повторить через 15-20 минут, а кроме того, нередко помогает изгоняющий массаж уретры на всем доступном ее протяжении или применение желобоватого зонда (ложки Фолькмана). Если все же получение чистого секрета представляется невозможным, специалистам приходится для бакпосева использовать первую часть мочи, хотя данный биоматериал может отрицательно повлиять на объективность полученных данных.

Отдельно, в случае воспаления предстательной железы или иных отделов мочеполовой системы может потребоваться промывание уретры специальным раствором, чтобы не допустить попадание продуктов воспаления в простатический сок.

Данная процедура, вкупе с самим массажем, в некоторых ситуациях может оказаться болезненной для пациента (в отличие от того же мазка из уретры), который и без того находится в напряженном состоянии. Из-за отечной и воспаленной простаты мужчине может быть настолько больно во время забора сока, что специалисту приходится прибегнуть к использованию анестетиков или даже седации.

Исследование секрета простаты

Изучение секрета простаты на предмет норм и отклонений состоит из нескольких различных исследовательских методик. К которым в лабораторных условиях прибегают, в зависимости от подозрений диагноза и целей, поставленных им. Работа в данном случае будет поделена на несколько последовательных этапов.

Макроскопия предстательного сока

В первую очередь, полученный простатический сок будет оценен согласно его физическим данным (по тому, как он выглядит), включая количество, цвет, прозрачность и плотность. Изменение кислотности среды, плотности жидкости, появление желтого или розового оттенка будут указывать на отклонения от нормы, как и наличие любых других примесей, включая слизь или комки.

Микроскопическое исследование

Микроскопическое исследование секрета предстательной железы прежде всего, изучает уровень лейкоза – количество лейкоцитов в соке, указывающих на наличие воспалительного процесса. Чем их больше, тем сильнее выражены процессы воспаления и застойности внутри железы. Обратно пропорциональным этому числу будет количество лецитиновых зерен, недостаток которых показывает снижение естественной мужской фертильности.

Дополнительно, сотрудником лаборатории будет оценено количество видимых под микроскопом амилоидных телец, эритроцитов и клеток многослойного ороговевшего эпителия, попавшего в секрет со стенок уретры.

БАК посев секрета простаты

Бактериологический посев простатического сока на флору – это главный способ выяснить тип инфекции, вызвавшей воспаление, и соответствующий антибиотик или группу антибиотиков для борьбы с выявленным возбудителем.

Среди микроорганизмов, способных привести к заболеванию, урологи выделяют следующие типы:

• золотистый стафилококк;
• кишечная палочка;
• клебсиелла;
• протей;
• энтеробактер;
• синегнойная палочка.

Бак посев может также выявить наличие грибковой флоры, вирусов или макрофагов, все из которых создают характерную картину — ее анализ даст врачу возможность подобрать соответствующее лечение.

ПЦР секрета простаты

Метод проведения полимеразной цепной реакции (ПЦР) требует комплексного подхода, и помимо секрета простаты для получения объективных данных потребуется также мазок из уретры и анализ крови ПСА. Сам по себе тест проводится для выявления возбудителя урогенитального микоплазмоза, и срок его анализа может занимать до трех суток с применением специальных амплификаторов и детекторов.

По результатам исследования у пациента может быть с высокой степенью точности выявлено одно из таких заболеваний, как кокковый уретрит, простатит, орхоэпидидимит, кольпит, цистит или эндоцервицит.

Расшифровка анализов

Расшифровкой анализа секрета простаты занимается лечащий врач, назначивший пациенту данное обследование – уролог или андролог. Доктор на основании полученных цифр и характеристик сумеет сделать правильный вывод и выстроить будущую тактику лечения.

Интерпретация лабораторных данных микроскопического исследования секрета невозможна без учета остальных показателей: жалоб и самочувствия пациента, анамнеза в его медицинской карте. Что касается непосредственно расшифровки анализов, на основании их сравнения с нормальными показателями достаточно опираться на следующую таблицу:

Источники: http://www.urolog-site.ru/materiali/saratov/rolpcr-prostatit.html, http://epidemiolog.org/deyatelnost-pcr-laboratorii/vzyatie-materiala-na-issledovanie/sekret-predstatelnoj-zhelezy-dlya-pcr, http://vprost.ru/prostata/analiz-sekreta-prostaty.html